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    如何進(jìn)行活體組織mRNA轉(zhuǎn)染

    發(fā)布時(shí)間: 2023-08-10  點(diǎn)擊次數(shù): 1524次

    Starvio mRNA活體組織轉(zhuǎn)染試劑專(zhuān)門(mén)用于活體動(dòng)物組織和臟器的mRNA介入轉(zhuǎn)染,目標(biāo)轉(zhuǎn)染臟器可以是肝臟、肺臟、乳腺等臟器,也可以是轉(zhuǎn)移瘤、種植瘤、肌肉、骨髓等組織。Starvio mRNA使用簡(jiǎn)便,只需將Starvio與mRNA充分混合,再局部注射入靶臟器或靶組織即可。Starvio mRNA不僅可以轉(zhuǎn)染活體小鼠,還可以轉(zhuǎn)染活體大鼠和兔子等。


    操作步驟:

    A. 計(jì)算mRNA的需要量,此mRNA應(yīng)高純處理,適當(dāng)修飾,適于動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)使用。


    B. 計(jì)算Starvio mRNA轉(zhuǎn)染試劑需要的劑量,需要 Starvio mRNA轉(zhuǎn)染試劑包裹。


    C. mRNA-Starvio混合物準(zhǔn)備:

    1.mRNA (濃度≥1μg/μL)溶解于 Trans buffer, 室溫放置5分鐘。。
    2.Starvio mRNA轉(zhuǎn)染試劑用Trans buffe稀釋?zhuān)p輕混勻,室溫放置5分鐘。
    3. 將mRNA溶液轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)染試劑中,輕輕混勻,室溫孵育15 分鐘。


    D. 用已滅菌的微量注射器或其它適當(dāng)器具將mRNA -Starvio混合物注射入目標(biāo)組織或臟器。


    E. 48小時(shí)后,取局部組織進(jìn)行檢測(cè)。


    注意:

    1.為了提高轉(zhuǎn)染效果,要對(duì)轉(zhuǎn)染條件進(jìn)行優(yōu)化,特別是第一次使用;

    2.轉(zhuǎn)染試劑的用量應(yīng)根據(jù) mRNA的用量進(jìn)行改變,其搭配比例可在本說(shuō)明書(shū)提供的比例基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化。



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